核酸分子雜交的定義如樓上,特點是:雜交的雙方是待測核酸和已知核酸序列,已知 核酸序列稱探針。
DNA變性與復(fù)性:
DNA變性:導(dǎo)致兩條DNA鏈間的氫鏈斷裂變?yōu)閱捂湹倪^程。
GC含量與Tm值之間的關(guān)系 (G+C)%=(Tm-69.3) ×2.44
Tm =(G+C)%×0.41+69.3
復(fù)性過程:(1)單鏈分子間碰撞形成局部雙鏈(2)局部雙鏈周圍的堿基如不配對時,雙鏈重新解離(3)局部雙鏈周圍的堿基如配對,則形成中心序列(4)形成完整的雙鏈分子
復(fù)性的速率服從二級反應(yīng)動力學(xué)
現(xiàn)在使用最多的是Southern雜交和Northern印跡雜交